Las proteínas B3 y PDI aisladas de plaquetas humanas se unen con el rotavirus ECwt in vitro / B3 and PDI proteins isolated from human platelets bind with ECwt rotavirus in vitro

Antecedentes. En la actualidad, no se dispone de integrina b3 de manera comercial y la PDI comercial tiene costos muy altos, lo cual dificulta el acceso a estas dos proteínas para realizar estudios conducentes a establecer si b3 y PDI interactúan con cepas de rotavirus silvestres. Objetivo. Explorar una metodología que permitiese aislar las proteínas b3 y PDI a partir de plaquetas humanas para generar anticuerpos policlonales en conejo contra la integrina b3 y evaluar la interacción entre las proteínas PDI y b3 con el rotavirus ECwt. Material y métodos. Mediante la técnica de electroforesis preparativa en condiciones reductoras, se separaron las proteínas de un lisado de plaquetas humanas y posteriormente se electroeluyeron. Mediante las técnicas de coinmunoprecipitación, “Western blotting” y ELISA de captura se analizó la interacción del rotavirus ECwt con las proteínas b3, y PDI. Resultados. Las proteínas totales de un lisado de plaquetas humanas se separaron mediante electroforesis en condiciones reductoras, se identificaron las proteínas b3 y PDI en un segmento del gel, utilizando anticuerpos comerciales en “Western blotting” y luego se aislaron estas dos proteínas del resto del gel. Posteriormente las proteínas se electroeluyeron del segmento del gel y se analizó su pureza. Conclusión. Se logró purificar parcialmente a partir de plaquetas humanas, utilizando electroforesis preparativa, cantidades relativamente altas de proteína b3 y PDI. El aislamiento de estas proteínas nos permitió generar un anticuerpo policlonal contra b3 y establecer que b3 y PDI se unen in vitro, luego de incubar las proteínas aisladas con el rotavirus ECwt, e in vivo, después de incubar el rotavirus con las vellosidades aisladas del intestino delgado de ratón lactante de la cepa ICR.

Fundamentos bioquímicos de la inmunotoxicología de los opiáceos / Fundamentals of opioid biochemical immunotoxicology

Se ha descubierto que la morfina, anteriormente conocida como una sustancia de origen vegetal extraída de la amapola, es sintetizada también por el cuerpo humano y hace parte del sistema opioide endógeno. La morfina endógena está involucrada en la regulación negativa del sistema inmune, regresándolo a sus condiciones basales luego de haber sido activado. Las investigaciones experimentales preclínicas y clínicas han mostrado que la administración de morfina conduce a efectos inmunosupresores, inhibiendo la actividad de las células asesinas naturales, la proliferación linfocitaria y la capacidad fagocítica de los polimorfonucleares y monocitos. Adicionalmente esta sustancia altera el patrón de síntesis, secreción y actividad paracrina de citocinas, favoreciendo así la respuesta inmune mediada por anticuerpos (Th2-dependiente) e inhibiendo la respuesta inmune mediada por células (Th1-dependiente). Estos efectos son suprimidos por la naloxona, un antagonista de los receptores m. Al parecer la morfina actúa a través de una nueva variante del receptor m de péptidos opioides denominado m3, presente en la superficie de las células inmunocíticas. Llama la atención la similitud entre los efectos inmunotóxicos generados en adictos al opio, VIH negativos, con aquellos observados en pacientes no drogadictos VIH positivos que progresan hacia sida.

Un modelo del mecanismo de entrada de los rotavirus a la célula hospedera / A model for the mechanism of entry of rotaviruses into the host cell

Antecedentes. La infección rotaviral es causa principal de gastroenteritis aguda severa en niños menores de cinco años. La capa protéica externa de la partícula viral está implicada en las interacciones iniciales virus-superficie celular. El mecanismo rotaviral de unión y entrada a la célula parece ser un proceso de múltiples pasos donde las proteínas rotavirales VP4 y VP7 interaccionan con diferentes moléculas de la superficie celular. Objetivo. Proponer un mecanismo de entrada de rotavirus a la célula que incorpore la actividad de la proteína disulfuro isomerasa (PDI). Material y métodos. Utilizando bases de datos electrónicas, se realizó una búsqueda de literatura original y de revisión publicada entre 1990 y 2009 sobre moléculas de la superficie rotaviral o celular participantes en el proceso de entrada del virus. El análisis de los resultados enfatizó las bases moleculares y celulares de las interacciones temporo-espaciales de las proteínas virales y las moléculas de unión/receptoras de la célula. Resultados. Se encontró fundamentos moleculares y celulares para incorporar la actividad de PDI a un mecanismo coherente de vías secuenciales o alternativas previas a la penetración viral. Se propone un mecanismo en que interaccionan las proteínas virales VP4, VP6 y VP7 con las moléculas de la superficie celular ácido siálico, integrinas, Hsc70 y PDI en un proceso endocítico caveola/“raft”-dependiente, caveolina/clatrina-independiente, dinamina-dependiente y sensible a depleción de colesterol. Conclusión. Se amplía el concepto de múltiples pasos en el proceso de entrada de rotavirus, donde la participación de PDI podría ser un blanco potencial de la acción de inhibidores de grupos tiol/disulfuro...

Aspectos básicos, clínicos y epidemiológicos de la influenza / Basic, clinical and epidemiological aspects of influenza

En respuesta a la continua expansión del nuevo virus de influenza A H1N1, la Organización Mundial de la Salud (OMS) elevó mundialmente el nivel de alerta pandémica a Fase 6 el 11 de junio de 2009 y declaró que el mundo se encontraba en el comienzo de la pandemia de influenza 2009. El presente artículo revisa y actualiza algunas de las características moleculares de los virus de la influenza A, las cuales le permiten a estos virus evadir la respuesta inmune adaptativa de largo plazo. Se destacan especialmente las características antigénicas, genéticas y epidemiológicas del nuevo virus de influenza A H1N1 de origen porcino. Dado que la influenza es una infección viral asociada con morbilidad y mortalidad significativas, este artículo revisa algunos temas clínicos, tales como características clínicas, diagnóstico diferencial y complicaciones relacionadas con la influenza. La preocupante emergencia y expansión de cepas de los virus de la influenza A resistentes a drogas antivirales es presentada en el contexto del tratamiento de la influenza. Se enfatizan los efectos de la vitamina D sobre la inmunidad innata como una probable explicación para algunas de las incongruencias epidemiológicas de la influenza. Se concluye que la vigilancia mundial debe ser intensificada para asegurar la prevención, el diagnóstico y el tratamiento de la influenza.

Cuantificación de colagenasa en pulpas de dientes temporales y permanentes / Quantification of collagenase in pulps from primary and permanent teeth

Con el fin de determinar y comparar la cantidad de colagenasa en pulpas de dientes temporales y permanentes, asociándola al proceso fisiológico de la reabsorción radicular en dientes temporales, se realizó este estudio en 25 pulpas sanas de 14 dientes permanentes y 11 temporales. Se cuantificó la cantidad de colagenasa empleando anticuerpos policlonales y detectándola por medio de la técnica de ELISA. Se estimó un promedio de colagenasa para las pulpas de dientes temporales de 49.02 ng. y para las pulpas de dientes permanentes de 35.72 ng. Estos hallazgos permiten evidenciar una diferencia significativa entre los dos tipos de pulpas, sin embargo es probable que el mecanismo de regulación enzimática no esté relacionado únicamente con la cantidad de la enzima, sino con su "actividad o inactividad" y por tanto la función de la colagenasa en la pulpa no sea igual en ambos tipos de dentición